Rekombinant Protein Antigene hunn dacks verschidde verschidde Epitopen, e puer vun deenen Sequenzepitopen sinn an e puer strukturell Epitope sinn.Polyklonal Antikörper, déi duerch Immuniséierung vun Déieren mat denaturéierten Antigene kritt ginn, si Mëschunge vun Antikörper spezifesch fir eenzel Epitopen a kënnen allgemeng benotzt ginn fir natierlech Strukturen oder denaturéiert Zilproteine z'entdecken.En Niewevirdeel fir denaturéiert Proteinen als Immunogenen ze benotzen ass datt denaturéiert Proteinen éischter méi immunogen sinn a kënnen eng staark Immunantwort bei Déieren stimuléieren.
Den Ausdrocksystem vun Escherichia coli gëtt normalerweis fir antigenesch Zwecker gewielt well et dee deierste System a punkto Zäit a Suen ass.Fir d'Méiglechkeet vum Zilproteinausdrock an d'Bequemlechkeet vun der Reinigung ze verbesseren, gëtt heiansdo nëmmen e klengt Fragment vum Zilprotein, sou wéi e spezifescht Domän, ausgedréckt.
Déi dreidimensional Struktur vu Proteinen
De spezifesche Domain vun engem Protein
Wann den Zweck vun der Antikörperpräparatioun eleng fir d'Wb Detektioun ass, ass et ekonomesch a séier synthetescht klengt Peptid als Antigen ze benotzen, awer et besteet e Risiko vu schwaacher Immunogenizitéit oder Net-Regenizitéit wéinst onpassend Auswiel vum Peptidsegment.Zënter Antikörperpräparatioun eng laang Period erfuerdert, ginn zwee oder dräi verschidde Peptidsegmenter dacks ausgewielt fir Antikörper mat Polypeptidantigen ze preparéieren fir den Erfollegsquote vum Experiment ze garantéieren.
D'Rengheet vum Polypeptid Antigen fir Immuniséierung ass erfuerderlech méi wéi 80% ze sinn.Och wann eng méi héich Rengheet theoretesch Antikörper mat enger besserer Spezifizitéit erhalen kann, an der Praxis produzéieren Déieren ëmmer eng grouss Zuel vun net spezifesche Antikörper, sou datt d'Virdeeler vun der Antigenreinheet maskéieren.
Zousätzlech muss d'Virbereedung vun Antikörper vu klenge Peptiden mat dem passenden Trägerantigen vernetzt ginn fir seng Immunogenizitéit ze verbesseren.Zwee allgemeng antigen Träger sinn KLH a BSA.
Post Zäit: Mar-23-2023