Déi meescht ufälleg fir HPLC Feeler a Léisungen

Als héichpräzis Instrument kann HPLC ganz einfach zu e puer lästeg kleng Probleemer féieren, wann et net op déi richteg Manéier während der Benotzung bedriwwe gëtt.Ee vun den heefegste Probleemer ass de Kolonnkompressiounsproblem.Wéi séier e defekt Chromatograph ze léisen.Den HPLC System besteet haaptsächlech aus enger Reservoirfläsch, enger Pompel, engem Injektor, enger Kolonn, enger Kolonntemperaturkammer, engem Detektor an engem Dateveraarbechtungssystem.Fir de ganze System sinn d'Pillaren, Pompelen an Detektoren d'Schlësselkomponenten an d'Haaptplazen, déi ufälleg fir Problemer sinn.

De Schlëssel zum Kolonnendrock ass dat Gebitt dat Opmierksamkeet brauch wann Dir HPLC benotzt.D'Stabilitéit vum Kolonndrock ass enk mat der chromatographescher Héichtform, der Kolonneffizienz, der Trennungseffizienz an der Retentiounszäit verbonnen.D'Kolonndrockstabilitéit heescht net datt den Drockwäert bei engem stabile Wäert stabil ass, mee éischter datt den Drockfluktuatiounsberäich tëscht 345kPa oder 50PSI ass (et erlaabt d'Benotzung vu Gradientelutioun wann de Kolonnendrock stabil ass a lues ännert).Ze héich oder ze niddreg Drock ass e Kolonnen Drock Problem.

Déi meescht ufälleg fir HPLC Feeler a Léisungen

1, héich Drock ass de meeschte gemeinsam Problem am Gebrauch vun HPLC.Dëst bedeit eng plötzlech Erhéijung vum Drock.Am Allgemengen ginn et déi folgend Grënn: (1) Am Allgemengen, ass dëst wéinst Flux Kanal Blockéierung.Zu dësem Zäitpunkt sollte mir et Stéck ënnersicht.a.Als éischt schneiden d'Inlet vun der Vakuumpompel of.Zu dësem Zäitpunkt gouf d'PEEK-Röhre mat Flëssegkeet gefëllt, sou datt d'PEEK-Röhre méi kleng war wéi d'Léisungsmëttelfläsch fir ze kucken, ob d'Flëssegkeet no Wëllen drëpst.Wann d'Flëssegkeet net dréit oder lues dréit, gëtt de Léisungsmëttelfilterkopf blockéiert.Behandlung: Soak an 30% Salpetersäure fir eng hallef Stonn a spülen mat ultrapure Waasser.Wann d'Flëssegkeet zoufälleg dréit, ass de Léisungsmëttelfilterkop normal a gëtt iwwerpréift;b.Öffnen de Purge Ventil sou datt d'mobil Phase net duerch d'Kolonn passéiert, a wann den Drock net wesentlech reduzéiert gëtt, gëtt de Filter wäisse Kapp blockéiert.Behandlung: Filtere Whiteheads goufen ewechgeholl an sonicated mat 10% Isopropanol fir eng hallef Stonn.Unzehuelen datt den Drock ënner 100PSI fällt, ass de gefilterte wäisse Kapp normal a gëtt iwwerpréift;c.Ewechzehuelen der Sortie Enn vun der Kolonn, wann den Drock net erofgoen, der Kolonn blockéiert.Behandlung: Wann et e Puffer Salz Blockage ass, spülen 95% bis den Drock normal ass.Wann d'Verhënnerung duerch e méi héich konservéiert Material verursaacht gëtt, sollt e méi staarke Stroum wéi déi aktuell mobil Phas benotzt ginn fir op den normalen Drock ze rennen.Wann de laangfristeg Reinigungsdrock net no der uewe genannter Method erofgeet, kann d'Inlet an d'Outlet vun der Kolonn considéréiert ginn, am Géigendeel mat dem Instrument verbonnen ze sinn, an d'Kolonn kann mat der mobiler Phase gereinegt ginn.Zu dësem Zäitpunkt, wann de Kolonndrock nach ëmmer net reduzéiert gëtt, kann d'Kolonnentrée-Siefplack nëmmen ersat ginn, awer wann d'Operatioun net gutt ass, ass et einfach fir d'Reduktioun vum Kolonneffekt ze féieren, also probéiert manner ze benotzen.Fir schwiereg Probleemer kann d'Kolonn Ersatz berücksichtegt ginn.

(2) Falsch Flux Taux Astellung: Korrekt Flux Taux kann zréckgesat ginn.

(3) Falsch Flowverhältnis: de Viskositéitsindex vu verschiddene Stréimproportiounen ass anescht, an de entspriechende Systemdrock vum Flow mat méi héijer Viskositéit ass och méi grouss.Wa méiglech, kënne Léisungsmëttel mat enger niddereger Viskositéit ersat ginn oder nei gesat a virbereet ginn.

(4) System Drock Null Drift: Ajustéieren der Null vun der Flëssegket Niveau Sensor.

2, den Drock ass ze niddreg (1) ass normalerweis duerch System Leckage verursaacht.Wat ze maachen: Fannt all Verbindung, besonnesch d'Interface op béide Säiten vun der Kolonn, a dréit d'Leckberäich fest.Ewechzehuelen de Post an zouzedrécken oder Linn de PTFE Film mat passenden Kraaft.

(2) De Gas geet an d'Pompel, awer den Drock ass normalerweis onbestänneg zu dëser Zäit, héich an niddreg.Méi eescht, d'Pompel wäert d'Flëssegkeet net absorbéieren.Behandlungsmethod: Öffnen de Botzventil a botzt mat enger Flowrate vun 3 ~ 5ml / min.Wann net, goufen d'Loftblasen um Auspuffventil mat engem speziellen Nadelröhr aspiréiert.

(3) Kee mobil Phase Ausfluss: kontrolléiert ob et eng mobil Phase an der Reservoirfläsch ass, ob de Spull an der mobiler Phase ënnerdaucht ass an ob d'Pompel leeft.

(4) De Referenzventil ass net zou: de Referenzventil ass no der Verzögerung zou.Et geet normalerweis erof op 0,1.~ 0,2mL/min nom Zoumaache vum Referenzventil.

Resumé:

An dësem Pabeier ginn nëmmen allgemeng Probleemer an der Flëssegchromatographie analyséiert.Natierlech, an eiser praktescher Applikatioun, wäerte mir méi aner Problemer begéinen.Beim Fehlerhandhabung sollte mir déi folgend Prinzipien verfollegen: nëmmen ee Faktor gläichzäiteg änneren fir d'Relatioun tëscht dem hypotheteschen Faktor an dem Problem ze bestëmmen;Allgemeng, wann Dir Deeler fir d'Problembehandlung ersetzt, sollte mir oppassen fir déi ofgebauten intakt Deeler erëm op der Plaz ze setzen fir Offall ze vermeiden;Eng gutt Rekordgewunnecht ze bilden ass de Schlëssel zum Erfolleg vu Feelerhandhabung.Als Conclusioun, wann Dir HPLC benotzt, ass et wichteg oppassen op d'Probevirbehandlung an déi richteg Operatioun an Ënnerhalt vun der Ausrüstung.